Bead beaters av rotortyp drivs av mikromotorer och anv\u00e4nder zirkoniumdioxidp\u00e4rlor f\u00f6r att bryta s\u00f6nder celler och sega v\u00e4vnader. Deras h\u00f6ga skjuvkraft ger en snabb och grundlig uppl\u00f6sning.<\/p>\n
Seriella sp\u00e4dningar av b\u00e5de m\u00e5lmikroorganismer och genomiskt DNA fr\u00e5n internkontrollen p\u00e4rlades med antingen OmniLyse-enheten eller industristandardb\u00e4nkmodellen Biospec Mini-BeadBeater i tre exemplar f\u00f6r att generera resultat f\u00f6r j\u00e4mf\u00f6relse vid varje koncentrationsniv\u00e5.<\/p>\n
Biospec erbjuder p\u00e4rlor i flera storlekar som \u00e4r utformade f\u00f6r att rikta in sig p\u00e5 olika v\u00e4vnader och celler, fr\u00e5n glas (diameter 2,5 mm, densitet 2,5 g\/cc) som anv\u00e4nds f\u00f6r p\u00e4rlbearbetning till zirkoniumdioxid-\/silikap\u00e4rlor med 50% h\u00f6gre densitet som \u00e4r idealiska f\u00f6r sporer och v\u00e4vnader) och skarpa granatpartiklar (densitet 4,1 g\/cc; p\u00e5skyndar v\u00e4vnadslysis) som finns i flaskor om ett pund.<\/p>\n
Alla tre medierna \u00e4r kemiskt inerta och motst\u00e5ndskraftiga mot fragmentering, vilket g\u00f6r dem till den perfekta l\u00f6sningen f\u00f6r att s\u00f6nderdela mikroorganismer, encellspreparat eller v\u00e4xt- och djurv\u00e4vnader med upp till 95% effektivitet p\u00e5 tre minuter.<\/p>\n
BeadBeater kan ocks\u00e5 anv\u00e4ndas med olika flaskstorlekar (upp till 1,0 mL) och blandare, inklusive vortexmaskiner.<\/p>\n
Laboratorieblandare och homogenisator f\u00f6r sm\u00e5prover tillverkad av rotor-stator i rostfritt st\u00e5l, beh\u00e4ndig och mobil, kraftfull motor med hastighetsreglering fr\u00e5n 5.000 till 30.000 varv\/min f\u00f6r blandning, emulgering, strimling eller hackning (inklusive stor mortel\/st\u00f6t f\u00f6r krossning) av prover med behandlingsbar volym p\u00e5 mindre \u00e4n 1\/2 ml.<\/p>\n
Ett prov p\u00e5 tv\u00e5 ml tinad myggv\u00e4vnad l\u00e4ggs i en steril homogeniseringsflaska med 2,0 mm zirkoniumdioxidp\u00e4rlor och 0,5 ml homogeniseringsmedium f\u00f6r att homogeniseras i tv\u00e5 minuter med hj\u00e4lp av SoniBeast Cell Disruptor fr\u00e5n BioSpec Products i Bartlesville, Oklahoma och f\u00f6rvaras som homogenat (se bilden nedan).<\/p>\n
Zirkoniumdioxid-\/silikap\u00e4rlor med en densitet p\u00e5 2,5 g\/cc anv\u00e4nds ofta f\u00f6r att p\u00e4rla bakterie-, j\u00e4st- och svamprover samt f\u00f6r att mala fr\u00f6n och blad torra, medan kromst\u00e5lp\u00e4rlor har en extremt h\u00f6g densitet p\u00e5 7,9 g\/cc och endast ska placeras i f\u00f6rst\u00e4rkta 2 ml mikroflaskor av polypropen eller polypropylen som t\u00e5l att st\u00e5lp\u00e4rlorna krossas; vanliga mikroflaskor av plast med skruvlock spricker eller l\u00e4cker vid kollision med st\u00e5lp\u00e4rlor.<\/p>\n
B\u00f6rja med kalla medier och prover f\u00f6r b\u00e4sta resultat, eftersom uppv\u00e4rmning under p\u00e4rlningen f\u00f6rs\u00e4mrar b\u00e5de kvaliteten och kvantiteten av nukleinsyror, proteiner och funktionella subcellul\u00e4ra organeller som isolerats fr\u00e5n lyserade celler eller organismer. En isvattenjacka hj\u00e4lper till att hantera temperaturen under p\u00e4rlningen.<\/p>\n
Mini-Beadbeater-Plus omr\u00f6r kraftigt upp till ett halvt gram biologiskt material som \u00e4r f\u00f6rseglat i en 2 ml mikroflaska med skruvlock och fylld med lysande glas-, zirkoniumdioxid- eller st\u00e5lp\u00e4rlor p\u00e5 90 sekunder utan skum- eller aerosolbildning, och s\u00f6nderdelar mikroorganismer, v\u00e4xt- eller djurv\u00e4vnader samt nukleinsyror med minimal korskontaminering mellan prover samt \u00e4r anv\u00e4ndbar vid isolering av nukleinsyror. F\u00f6r optimala resultat ska fasta prover f\u00f6rst hackas i bitar med ett tv\u00e4rsnitt p\u00e5 mindre \u00e4n 1 mm med ett eneggat rakblad eller fragmenteras i flytande kv\u00e4ve med hj\u00e4lp av BioPulverizer fr\u00e5n BioSpec Products.<\/p>\n
Glasp\u00e4rlor har vanligtvis en densitet p\u00e5 2,5 g\/cc och \u00e4r det sj\u00e4lvklara valet f\u00f6r applikationer med beadbeating. Zirkonia\/Silica-p\u00e4rlor har 50% h\u00f6gre densitet \u00e4n glas - perfekt f\u00f6r tuffa v\u00e4vnader som sporer. Vassa partiklar av kromst\u00e5l har en densitet p\u00e5 7,9 g\/cc f\u00f6r malning av torkade blad eller fr\u00f6n vid kryotemperaturer; n\u00e4r torrmalning vid kryotemperaturer \u00e4r n\u00f6dv\u00e4ndig m\u00e5ste dock speciella \"XXTuff\"-f\u00f6rst\u00e4rkta polypropylen- eller rostfria st\u00e5lmikroflaskor anv\u00e4ndas, eftersom vanliga glas-\/polypropylenflaskor kan spricka under h\u00f6ga skakningsenergier eller h\u00f6gt tryck som genereras av \"Beadbeater\".<\/p>\n
Granat (en skarp j\u00e4rn-aluminiumsilikatpartikel) har en densitet p\u00e5 4,1 g\/cc och kan snabbt avl\u00e4gsna bakterierika v\u00e4vnader samt fekala prover fr\u00e5n jordprover och fekala prover, till skillnad fr\u00e5n dess motsvarighet i kiselkarbid (SiC) som kan fragmenteras under tryck.<\/p>\n
PMSA \u00e4r en effektiv metod f\u00f6r att detektera potentiella rekombinanta prioner, d\u00e4r zirkoniumdioxid-kiseldioxidp\u00e4rlor ger utm\u00e4rkt s\u00e5ddkapacitet som g\u00f6r att de kan spridas eller expandera i efterf\u00f6ljande reaktioner av PMSA-reaktionen. Det v\u00e4cker viktiga fr\u00e5gor om spontan felveckning av proteiner i biologiska system och ger upphov till betydande spekulationer om dess natur och frekvens. PMSA-proceduren erbjuder ett billigt och enkelt s\u00e4tt att identifiera distinkta rekombinanta prionstammar via elektroforetiska bandm\u00f6nster efter proteinas K-digestion (PMSA-proceduren).<\/p>\n
PMSA-reaktioner kan utf\u00f6ras med hj\u00e4lp av olika p\u00e4rlor ut\u00f6ver glasp\u00e4rlor, d\u00e4r zirkoniumsilikatp\u00e4rlor med en diameter p\u00e5 1 mm \u00e4r det optimala valet f\u00f6r att inducera sann spontan felveckning av rec-PrP p\u00e5 grund av deras h\u00f6gre densitet (3,0 g\/cc j\u00e4mf\u00f6rt med 2,5 g\/cc i glasp\u00e4rlor), vilket \u00f6kar spridningen av f\u00f6rformade prioner.<\/p>\n
F\u00f6r att avg\u00f6ra om zirkoniumsilikatp\u00e4rlor kunde utl\u00f6sa en verklig spontan felveckning av rec-PrP sp\u00e4ddes torkade prionbelagda glassf\u00e4rer seriellt (1:10 fr\u00e5n 10-1 till 10-8) med PMSA-substrat, kompletterat med tre zirkoniumsilikatp\u00e4rlor med en diameter p\u00e5 en millimeter fr\u00e5n BioSpec Products Inc (BioSpec). Efter att reaktionen hade p\u00e5g\u00e5tt i 24 timmar vid 39 grader med skakning 700 rpm och skakning vid 39 grader C, togs p\u00e4rlorna upp, tv\u00e4ttades noggrant i PBS innan de \u00e5teranv\u00e4ndes som fr\u00f6n i en annan reaktion med nytt substrat och ytterligare icke prionbelagda p\u00e4rlor.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Bead-beaters av rotortyp drivs av mikromotorer och anv\u00e4nder zirkoniumdioxidp\u00e4rlor f\u00f6r att bryta s\u00f6nder celler och sega v\u00e4vnader. Deras h\u00f6ga skjuvkraft ger en snabb och grundlig uppl\u00f6sning. Seriella utsp\u00e4dningar av b\u00e5de m\u00e5lmikroorganismer och genomiskt DNA f\u00f6r intern kontroll p\u00e4rlades med antingen OmniLyse-enheten eller industristandardb\u00e4nk Biospec Mini-BeadBeater i tre exemplar f\u00f6r att generera ...<\/p>\n