Biospec Zirkonia parelmedia

Rotor-type kloppers worden aangedreven door micromotoren en maken gebruik van zirkonia parels voor het breken van cellen en taai weefsel. Hun hoge schuifkracht zorgt voor een snelle en grondige verstoring.

Seriële verdunningen van zowel doelmicro-organismen als intern controlegenomisch DNA werden in drievoud gepareld met het OmniLyse-apparaat of de standaardbenchtop Biospec Mini-BeadBeater om resultaten te genereren voor vergelijking op elk concentratieniveau.

Maten

Biospec biedt verschillende maten korrels die ontworpen zijn om verschillende weefsels en cellen aan te pakken, van glas (diameter 2,5 mm, dichtheid van 2,5 g/cc) gebruikt voor beadbeating tot Zirconia/Silicakorrels met 50% hogere dichtheden die ideaal zijn voor sporen en weefsels) en scherpe granaatdeeltjes (dichtheid 4,1 g/cc; versnelt weefsellyse) verkrijgbaar in flessen van een pond.

Alle drie de parelmedia zijn chemisch inert en bestand tegen fragmentatie, waardoor ze de ideale oplossing zijn voor het verstoren van micro-organismen, preparaten van afzonderlijke cellen of plantaardig/dierlijk weefsel met een efficiëntie tot 95% in drie minuten.

De BeadBeater kan ook worden gebruikt met verschillende maten flacons (tot 1,0 ml) en mixers, waaronder vortexers.

Laboratoriummenger en homogenisator voor kleine monsters, gemaakt van roestvrijstalen rotor-stator, handig en mobiel, krachtige motor met snelheidsregeling van 5000 tot 30.000 tpm voor het mengen, emulgeren, versnipperen of fijnhakken (inclusief grote mortier/staaf om te vermalen) van monsters met een verwerkbaar volume van minder dan 1/2 ml.

Toepassingen

Een monster van twee ml ontdooid muggenweefsel wordt toegevoegd aan een steriel homogenisatiemicrovaatje met 2,0 mm Zirconia korrels en 0,5 ml Homogenisatie Media om gedurende twee minuten gehomogeniseerd te worden met de SoniBeast Cell Disruptor van BioSpec Products uit Bartlesville, Oklahoma en opgeslagen als homogenaat (zie afbeelding hieronder).

Zirconia/silicakorrels met een dichtheid van 2,5 g/cc worden veel gebruikt voor het beparelen van bacteriële, gist/schimmelmonsters en voor het droogmalen van zaden en bladeren, terwijl chroomstalen korrels een extreem zware dichtheid hebben van 7,9 g/cc en alleen in versterkte of polypropyleen microvaatjes van 2 ml geplaatst moeten worden die bestand zijn tegen het platdrukken van stalen korrels; gewone plastic microvaatjes met schroefdop zullen barsten of lekken onder invloed van botsingen met stalen korrels.

Begin met koude media en monsters voor optimale resultaten, aangezien opwarming tijdens het parelen zowel de kwaliteit als de kwantiteit van nucleïnezuren, eiwitten en functionele subcellulaire organellen geïsoleerd uit gelyseerde cellen of organismen zal aantasten. Een ijswatermantel helpt bij het beheren van de temperatuur tijdens het parelen.

Veiligheid

De Mini-Beadbeater-Plus roert met geweld tot een halve gram biologisch materiaal in een 2 ml microvial met schroefdop gevuld met glazen, zirkonium of stalen lysingkorrels in 90 seconden zonder schuim- of aerosolvorming, waarbij micro-organismen, plantaardig of dierlijk weefsel en nucleïnezuren uiteenvallen met minimale kruisbesmetting tussen monsters en nuttig zijn bij nucleïnezuurisolatie. Voor optimale resultaten moeten vaste monsters eerst in stukjes van minder dan 1 mm doorsnede worden gehakt met een scheermesje met één rand of gefragmenteerd bij vloeibare stikstoftemperatuur met BioPulverizer van BioSpec Products.

Glasparels hebben doorgaans een dichtheid van 2,5 g/cc en zijn de eerste keuze voor beadbeatingstoepassingen. Zirkonia/silicakorrels hebben 50% meer dichtheid dan glas - ideaal voor taai weefsel zoals sporen. Chroomstalen scherpe deeltjes hebben een dichtheid van 7,9 g/cc voor het malen van gedroogde bladeren of zaden bij cryotemperaturen; als droog malen bij cryotemperaturen echter noodzakelijk is, moeten speciale "XXTuff" versterkte polypropyleen of roestvrijstalen microvaatjes worden gebruikt, aangezien gewone glazen/polypropyleen flesjes kunnen barsten onder de hoge schud-energie of hoge druk die door de "Beadbeater" wordt gegenereerd.

Granaat (een scherp ijzer-aluminiumsilicaatdeeltje) heeft een dichtheid van 4,1 g/cc en kan snel bacterierijke weefsels en fecale monsters uit bodemmonsters en fecesmonsters verwijderen, in tegenstelling tot zijn tegenhanger siliciumcarbide (SiC) die onder druk kan versplinteren.

FAQ

PMSA biedt een efficiënte methode voor het detecteren van potentiële recombinante prionen, waarbij zirconiumdioxide-korrels uitstekende seeding-capaciteiten bieden die hun vermeerdering of uitbreiding in volgende reacties van de PMSA-reactie mogelijk maken. Het roept belangrijke vragen op over spontane eiwitmisvouwing in biologische systemen en doet belangrijke speculaties rijzen over de aard en frequentie ervan. De PMSA-procedure biedt een goedkope en eenvoudige manier om verschillende recombinante prionstammen te identificeren via elektroforetische bandpatronen na proteïnase K-digestering (PMSA-procedure).

PMSA-reacties kunnen worden uitgevoerd met verschillende bolletjes naast glazen bolletjes, waarbij zirkoniumsilicaatbolletjes met een diameter van 1 mm de optimale keuze zijn voor het induceren van echte spontane rec-PrP misvouwing vanwege hun hogere dichtheid (3,0 g/cc vergeleken met 2,5 g/cc in glazen bolletjes), waardoor de voortplanting van voorgevormde prionen toeneemt.

Om te bepalen of zirkoniumsilicaatbolletjes echte spontane rec-PrP misvouwing konden veroorzaken, werden gedroogde met prionen gecoate glazen bolletjes serieel verdund (1:10 van 10-1 tot 10-8) met PMSA-substraat, aangevuld met drie zirkoniumsilicaatbolletjes met een diameter van één millimeter van BioSpec Products Inc (BioSpec). Nadat de reactie 24 uur had voltooid bij 39 graden met 700 omwentelingen per minuut en schudden bij 39 degC, werden de bolletjes teruggewonnen, grondig gewassen in PBS voordat ze opnieuw werden gebruikt als zaadjes in een andere reactie met vers substraat en extra niet-prion-gecoate bolletjes.